Vnitr Lek 2008, 54(2):139-145

Sledování protinádorové buněčné imunitní odezvy u nemocných s renálním karcinomem, porucha proliferace T-lymfocytů

Š. Lukešová1,4,*, V. Vroblová2, D. Hlávková2, O. Kopecký1,4, D. Vokurková2, P. Morávek3, H. Šafránek3, P. Souček2
1 II. interní klinika Lékařské fakulty UK a FN Hradec Králové, přednosta. prof. MUDr. Jaroslav Malý, CSc.
2 Ústav klinické imunologie a alergologie Lékařské fakulty UK a FN Hradec Králové, přednosta prof. RNDr. Jan Krejsek, CSc.
3 Urologická klinika Lékařské fakulty UK a FN Hradec Králové, přednosta. doc. MUDr. Petr Morávek, CSc.
4 Oddělení klinické imunologie a mikrobiologie Oblastní nemocnice Náchod, prim. doc. MUDr. Otakar Kopecký, CSc.

Úvod:
Řada pozorování nasvědčuje tomu, že u nemocných s renálním karcinomem (renal cell carcinoma - RCC) hraje imunitní systém důležitou roli při kontrole růstu nádoru. RCC je více než jiné nádory infiltrován leukocyty (Tumor Infiltrating Lymphocytes - TIL). Dominantní populaci TIL buněk tvoří T-lymfocyty. Názory na úlohu T-lymfocytárních subpopulací, B-lymfocytů a NK buněk v protinádorové odezvě nejsou jednotné.

Cíl:
Stanovit fenotyp a aktivaci lymfocytárních buněk a porovnat jejich zastoupení v nádorovém stromatu (TIL), v periferní krvi a v krvi z renální žíly u nemocných s RCC.


Soubor nemocných a metodika:
Vzorky periferní krve z kubitální a renální žíly a buňky nádorového stromatu byly získány od 60 pacientů v průběhu operace pro primární RCC. TIL byly izolovány z mechanicky dezintegrované nádorové tkáně. PBL a TIL byly podrobeny imunofenotypové multiparametrové analýze. Pomocí průtokového cytometru byly charakterizovány jejich povrchové a aktivační znaky.

Výsledky:
Hlavní populací TIL byly T-lymfocyty CD3+ (70,4 %). Počet CD3+/CD8+ T-lymfocytů byl signifikantně vyšší v TIL, 39,7 % (p < 0,01), zatímco CD4+ T-lymfocyty byly většinovou populací v periferní krvi, 41,35 % (p < 0,001). Zastoupení CD3+/69+ T-lymfocytů bylo signifikantně vyšší v TIL (32,05 %) než v PBL (p < 0,001). Naopak, počty CD3+/CD25+, CD8+/57+ a CD4+/RA+ (naivní CD4+ T-lymfocyty) byly vyšší v PBL (p < 0,001). Rozdíly v zastoupení NK buněk (CD3-/16+56+) a CD3+/DR+ T buněk v TIL a PBL nebyly signifikantní.

Závěr:
Uvedené výsledky dokazují, že v porovnávaných kompartmentech (tumor/PBL) jsou charakteristiky a intenzita protinádorové odezvy rozdílné. CD3+/CD8+ T-lymfocyty jsou dominantní lymfocytární populací TIL. Znalost fenotypu a funkcí efektorových buněk zodpovědných za protinádorovou odpověď jsou základní podmínkou pochopení protinádorové imunitní odpovědi a jejího selhání.

Klíčová slova: tumor-infiltrující lymfocyty; CD4; CD8; průtoková cytometrie; renální karcinom

Monitoring of anti-tumour cell-mediated response in patients with renal cell carcinoma, disturbance of T cell proliferation

Introduction:
When checking tumour growth, a number of observations indicate that the immune system plays a significant role in patients with renal cell carcinoma ("RCC"). Infiltration by lymphocytes (tumour infiltrating lymphocytes, "TILs") is more prevalent in RCC than any other tumours. T lymphocytes are the dominant population of TIL cells. Views concerning the role of T lymphocytic subpopulations, B lymphocytes and NK cells in an anti-tumour response are not established.

Aim:
The aim is to determine the phenotype and activation of lymphocytic cells and to compare their representation in tumour stroma (TIL), peripheral blood (PBL) and renal vein blood in patients with RCC.

Patients and methods:
The samples of peripheral blood taken from the cubital and renal veins and tumour stroma cells were obtained from 60 patients in the course of their surgeries carried out due to primary RCC. TILs were isolated from mechanically disintegrated tumour tissue. Immunophenotype multiparametric analysis of PBL and TILs was carried out. Their surface and activation characteristics were determined by means of flow cytometer.

Results:
CD3+ T lymphocytes (70.4 %) were the main population of TILs. The number of CD3+/CD8+ T lymphocytes was significantly higher in TILs, 39.7 % (p < 0.01), while CD4+ T lymphocytes were the majority population in peripheral blood, 41.35 % (p < 0.001). The representation of CD3+/69+ T lymphocytes was significantly higher in TILs, 32.05 %, compared to PBL (p < 0.001). On the contrary, the numbers of CD3+/CD25+, CD8+/57+ and CD4+/RA+ (naive CD4+ T lymphocytes) were higher in PBL (p < 0.001). The differences in representation of (CD3-/16+56+) NK cells and CD3+/DR+ T cells in TILs and PBL were not significant.

Conclusion:
The above-mentioned results prove that the characteristics and intensity of anti-tumour responses are different in compared compartments (tumour/PBL). CD3+/CD8+ T lymphocytes are the dominant lymphocytic population of TILs. The knowledge of phenotype and functions of effector cells, which are responsible for anti-tumour response, are the basic precondition for understanding the anti-tumour immune response and the cause of its failure.

Keywords: tumour-infiltrating lymphocytes; CD4; CD8; flow cytometry; renal cell carcinoma

Vloženo: 18. prosinec 2006; Přijato: 8. říjen 2007; Zveřejněno: 1. únor 2008  Zobrazit citaci

ACS AIP APA ASA Harvard Chicago Chicago Notes IEEE ISO690 MLA NLM Turabian Vancouver
Lukešová Š, Vroblová V, Hlávková D, Kopecký O, Vokurková D, Morávek P, et al.. Sledování protinádorové buněčné imunitní odezvy u nemocných s renálním karcinomem, porucha proliferace T-lymfocytů. Vnitr Lek. 2008;54(2):139-145.
Sdílet...
Stáhnout citaci
  • BibTeX (.bib)
  • Bookends (.ris)
  • EasyBib (.ris)
  • EndNote (.enw)
  • EndNote 8 (.xml)
  • ISI WoS (.isi)
  • Medlars (.medlars)
  • Mendeley (.ris)
  • MODS (.xml)
  • Papers (.ris)
  • RefWorks (.txt)
  • RefManager (.ris)
  • RIS (.ris)
  • MS Word (.xml)
  • Zotero (.ris)
    • Zobrazit celý článek

    Reference

    1. Bayer AL, Baliga P, Woodward JE. Differential effects of transferrin receptor blockade on cellular mechanisms involved in graft rejection. Transplant Immunol 1999; 7: 131. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    2. Bayer AL, Baliga P, Woodward JE. Transferrin receptor in T cell activation and transplantation. J Leukocyte Biol 1998; 64: 19. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    3. Bilik R, Mor C, Hazaz B et al. Characterisation of T lymphocyte populations infiltrating primary breast cancer. Cancer Immunol. Immunother 1989; 28: 143-147. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    4. Böhm M, Ittenson A, Schierbaum KF et al. Pretreatment with interleukin-2 modulates peri-operative immuno-dysfunction in patients with renal cell carcinoma. Eur Urol 2002; 41: 458-468. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    5. Bremers AJA, Parmiani G. Immunology and immunotherapy of human cancer: present concepts and clinical developments. Crit Rev Oncol Hematol 2000; 34: 1-25. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    6. Bubeník J. Interleukin-2 Therapy of Cancer. Folia Biol (Praha) 2004; 50: 120-130. Přejít na PubMed...
    7. Coventry BJ, Weeks SC, Heckford SE et al. Lack of IL-2 cytokine expression despite IL-2 messenger RNA transcription in tumor-infiltrating lymphocytes in primary human breast carcinoma: selective expression of early activation markers. J Immunol 1996; 156: 3486. Přejít k původnímu zdroji...
    8. Chadburn A, Inghirami G, Knowels DM. The kinetics and temporal expression of T cell activation-associated antigens CD15 (LeuM1), CD30 (Ki-1) EMA and CD11c (LeuM5) by benign activated T cells. Hematol Pathol 1992; 6: 193.
    9. Chakraborty NG, Sporn JR, Pasquale DR et al. Suppression of lymphokine-activated killer cell generation by tumor-infiltrating lymphocytes. Clin Immunol Immunopathol 1991; 59: 407-416. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    10. Characiejus D, Pašukoniené V, Kazlauskaité N et al. Predictive value of CD8highCD57+ lymphocyte subset in interferon therapy of patients with renal cell carcinoma. Anticancer Res 2002; 22: 3679-3684.
    11. de Jong EC, Smits HH, Kapsenberg ML. Dendritic cell-mediated T cell polarization. Spr Sem Immun 2005; 26: 289-307. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    12. Donskov F, Bennedsgaard KM, von der Maase H et al. Intratumoural and peripheral blood lymphocyte subsets in patients with metastatic renal cell carcinoma undergoing interleukin-2 based immunotherapy: association to objective response and survival. Br J Cancer 2002; 87: 194-201. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    13. Eckschlager T, Kodet R. Renal cell carcinoma in children: a single institution's experience. Med Pediatr Oncol 1994; 23: 36-39. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    14. Elsässer-Beile U, Gierschner D, Welchner T et al. Different expression of Fas and Fas ligand in tumor infiltrating and peripheral lymphocytes of patients with renal cell carcinomas. Anticancer Res 2003; 23: 433-438. Přejít na PubMed...
    15. Elsässer-Beile U, Grussenmeyer T, Gierschner D et al. Semiquantitative analysis of Th1 and Th2 cytokine expression in CD3+, CD4+, and CD8+ renal-cell-carcinoma-infiltrating lymphocytes. Cancer Immunol. Immunother 1999; 48: 204-208. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    16. Hayakawa K, Morita T, Augustus LB et al. Human renal cell carcinoma cells are able to activate natural killer cells. Int J Cancer 1992; 51: 290. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    17. Igarashi T, Takahashi H, Tobe T et al. Effect of tumor-infiltrating lymphocyte subsets on prognosis and susceptibility to interferon therapy in patients with renal cell carcinoma. Urol Int 2002; 69: 51-56. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    18. Indrová M, Bubeník J, Jakoubková J et al. Subcutaneous interleukin-2 in combination with vinblastine for metastatic renal cancer: cytolytic activity of peripheral blood lymphocytes. Neoplasma 1994; 41: 197-200. Přejít na PubMed...
    19. Klener P jr, Anděra L, Klener P et al. Cell death signalling pathway in the pathogenesis and therapy of haematologic malignancies: Overview of therapeutic approaches. Folia Biol (Praha) 2006; 52: 119-136. Přejít na PubMed...
    20. Koo AS, Tso CL, Shimabukuro T et al. Autologous tumor-specific cytotoxicity of tumor-infiltrating lymphocytes derived from human renal cell carcinoma. J Immunother 1991; 10: 347-354. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    21. Kowalczyk D, Skorupski W, Kwias Z et al. Flow cytometric analysis of tumour-infiltrating lymphocytes in patients with renal cell carcinoma. Br J Urol 1997; 80: 543-547. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    22. Kronke M, Leonard WJ, Depper JM et al. Sequential expression of genes involved in human T lymphocyte growth and differentiation. J Exp Med 1985; 161: 1593-1598. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    23. Lucivero G, Dalla Mora L, Bresciano E et al. Functional characteristics of cord blood T lymphocytes after lectin and anti-CD3 stimulation. Differences in the way T cells express activation molecules and proliferate. Int J Clin Res 1996; 26: 255. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    24. Lukešová Š, Kopecký O, Vroblová V et al. Porovnání v zastoupení lymfocytárních populací u světlobuněčného karcinomu ledviny (v nádorové tkáni, renální žíle a periferní krvi). 307-309. In: Edukační sborník z XXX. brněnských onkologických dnů s XX. Konferencí pro sestry a laboranty. Brno: Masarykův onkologický ústav 2006.
    25. Malinowski K, Kono K, Takayama T et al. Inhibition of lymphocyte proliferative responses by renal cell carcinoma extract. Transplant Proc 1997; 29: 839. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    26. Martel CL, Lara PN Renal cell carcinoma: current status and future directions. Crit Rev Oncol Hematol 2003; 45: 177-190. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    27. Mitropoulos D, Kooi S, Rodriguez-Villanueva J et al. Characterization of fresh (uncultured) tumour-infiltrating lymphocytes (TIL) and TIL-derivied T cell lines from patients with renal cell carcinoma. Clin Exp Immunol 1994; 97: 321-327. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    28. Nakamura K, Kitani A, Fuss I et al. TGF-β1 plays an important role in the mechanism of CD4+ CD25- regulatory T cell activity in both humans and mice. J Immunol 2004; 172: 834-842. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    29. Panelli MC, Nagorsen D, Wang E et al. Mechanism of immune response during immunotherapy. Yonsei Med J 2004; 45 (Suppl): 15-17. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    30. Park H, Paik D, Jang E et al. Acquisition of anergic and suppressive activities in transforming growth factor-β-costimulated CD4+ CD25- T cells. Inter Immunol 2004; 16: 1203-1213. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    31. Reed JC, Alpers JD, Nowell PC et al. Sequential expression of protooncogenes during lecitin-stimulated mitogenesis of normal human lymphocytes. Proc Natl Acad Sci USA 1986; 83: 3982-3986. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    32. Rodriguez MA, De Sanctis JB, Blasini AM et al. Human IFN-γ up-regulates IL-2 receptors in mitogen-activated T lymphocytes. Immunol 1990; 69: 554.
    33. Santin AD, Ravaggi A, Bellone S et al. Tumor-infiltrating lymphocytes contain higher numbers of type 1 cytokine expressors and DR+ T cells compared with lymphocytes from tumor draining lymph nodes and peripheral blood in patients with cancer of the uterine cervix. Gynecol Oncol 2001; 81: 424-432. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    34. Shabtai M, Ye H, Frischer Z et al. Increased expression of activation markers in renal cell carcinoma infiltrating lymphocytes. J Urol 2002; 168: 2216-2219. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    35. Schoof DD, Terashima Y, Peoples GE et al. CD4+ T cell clones isolated from human renal cell carcinoma possess the functional characteristics of Th2 helper cells. Cellular Immunol 1993; 150: 114-123. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    36. Tiemessen MM, Kunzmann S, Schmidt-Weber CB et al.: Transforming growth factor-β inhibits human antigen-specific CD4+ T cell proliferation without modulating the cytokine response. Inter Immunol 2003; 12: 1495-1504. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    37. van den Hove LE, van Gool SW, van Poppel H et al. Identification of an enriched CD4+ CD8α++ CD8β+ T-cell subset among tumor-infiltrating lymphocytes in human renal cell carcinoma. Int J Cancer 1997; 71: 178. Přejít k původnímu zdroji...
    38. van den Hove LE, van Gool SW, van Poppel H et al. Phenotype, cytokine production and cytolytic capacity of fresh (uncultured) tumour-infiltrating lymphocytes in human renal cell carcinoma. Clin Exp Immunol 1997; 109: 501-509. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    39. Whiteside TL, Herberman RB The role of natural killer cells in immune surveillance of cancer. Curr Opinion Immunol 1995; 7: 704-710. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    40. Whitford P, Mallon EA, George WD et al. Flow cytometric analysis of tumour infiltrating lymphocytes in breast cancer. Br J Cancer 1990; 62: 971-975. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    41. Zeromski J, Dworacki G, Kruk-Zagajewska A et al. Assessment of immunophenotype of potentially cytotoxic tumor infiltrating cells in laryngeal carcinoma. Arch Immunol Ther Exp 1993; 41: 57-62.

    Zpět na obsah


    Vnitřní lékařství

    Vážená paní, pane,
    upozorňujeme Vás, že webové stránky, na které hodláte vstoupit, nejsou určeny široké veřejnosti, neboť obsahují odborné informace o léčivých přípravcích, včetně reklamních sdělení, vztahující se k léčivým přípravkům. Tyto informace a sdělení jsou určena výhradně odborníkům dle §2a zákona č.40/1995 Sb., tedy osobám oprávněným léčivé přípravky předepisovat nebo vydávat (dále jen odborník).
    Vezměte v potaz, že nejste-li odborník, vystavujete se riziku ohrožení svého zdraví, popřípadě i zdraví dalších osob, pokud byste získané informace nesprávně pochopil(a) či interpretoval(a), a to zejména reklamní sdělení, která mohou být součástí těchto stránek, či je využil(a) pro stanovení vlastní diagnózy nebo léčebného postupu, ať už ve vztahu k sobě osobně nebo ve vztahu k dalším osobám.

    Prohlašuji:

    1. že jsem se s výše uvedeným poučením seznámil(a),
    2. že jsem odborníkem ve smyslu zákona č.40/1995 Sb. o regulaci reklamy v platném znění a jsem si vědom(a) rizik, kterým by se jiná osoba než odborník vstupem na tyto stránky vystavovala.

    Ne
    Ano

    Pokud vaše prohlášení není pravdivé, upozorňujeme Vás,
    že se vystavujete riziku ohrožení svého zdraví, popřípadě i zdraví dalších osob.